PH1700-EO | MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒 MTS Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

使用方法
活性测定使用方法：
1. 收集细胞，加细胞悬液100 μl（约5000-10000个细胞）到96孔板（边缘孔用无菌水或PBS填充）。每板设对照（加100ul培养基）。
2. 置37℃，5% CO2孵育过夜，倒置显微镜下观察。
3. 每孔加入10 μl 待检测药物溶液， 37℃孵育。
4. 每孔加入10 μl MTS溶液，37℃孵育1-4 小时。
5. 测定490 nm各孔的吸光值。
6. 同时设置空白孔（培养基和MTS溶液，无细胞），对照孔（不加药培养基和MTS溶液，有细胞），每组设定3-5复孔。 结果分析 ：


细胞活力计算：
将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =（加药细胞OD-空白OD/对照细胞OD-空白OD）×100

注意事项：
1.冰袋运输，2-8℃保存，长期不用可以-20℃保存。有效期12个月。
2.需要长期保存可以分装后-20℃保存，避免反复冻融。
3.试剂拆封后请尽快使用完！

产品特点
1.易于使用：直接将MTS溶液，加入到细胞中，孵育然后读取吸光度值。
2.快速：在96孔板中进行检测，不需洗涤或收获细胞。也不需要溶解步骤。因为MTS甲臢产物可溶解在组织培养基中。
3.非放射性：不需液闪混合液，不需处理放射性废物（不像[3H]-胸腺嘧啶）。
4.灵活：平板被读数后还可以放回温箱继续颜色反应（不像MTT）。
5.安全：不需要挥发性有机溶剂来溶解甲臢化合物（不像MTT）。


产品应用
酶标仪
仪器准备
1.带有450nm滤光片的酶标仪 2. CO2培养箱

自备试剂

1.PBS 2.纯水

使用注意事项
1.需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
2.用培养基或PBS来配制待检测药物。
3.如果待测药物可能有还原性，则测定不含细胞，仅含有MTS的待测药物溶液在490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100 μl培养基和10 μl MTS进行检测。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.加MTS溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育1小时即可，白细胞需要培养较长时间。
6.如果不是使用96孔板检测，MTS溶液的用量相应等比例增加即可。
7.有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。加 MTS试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基液面下加，容易产生气泡，会干扰O.D值读数。


常见问题分析

1.检测时需要换液吗？
如果待测药物有还原性，需要换液，否则不需要。

2.如何判断待测药物是否含有还原性？
测定不含细胞，仅含有待测药物的溶液加入MTS反应后的在490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，说明待测药物没有还原性或还原性很小，对MTS没有影响，则可以不换液，在培养基中直接加入MTS ；如果吸光度相对较大，说明药物具有较强的还原性，则需要除去含药物的培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100 μl培养基和10 μl MTS进行检测。