PH0528 | Hoechst 33342 染色液

货号 PH0528
名称 Hoechst 33342 染色液
规格 10mL | 50mL
存储 -20℃避光保存，一年有效。


产品简介

Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O，分子量为615.99，CAS Number 23491-52-3。
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
Hoechst 33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm。

本Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。


使用方法

1. 对于固定的细胞或组织：

a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。


2. 对于活细胞或组织：

a. 加入适当量Hoechst 33342染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

注意事项

1）本Hoechst 33342 染色液的浓度经过优化，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的Hoechst 33342，请选购Phygene的Hoechst 33342 (PH0527)。
2）荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3）为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4）Hoechst 33342对人体有害，请注意适当防护。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。