原产于中国PH1399 | 双缩脲蛋白定量试剂盒(Biuret Protein Quantification Kit)

  • 商品货号 PH1399
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产品名称 : PH1399 | 双缩脲蛋白定量试剂盒(Biuret Protein Quantification Kit)
产品品牌 : 飞净 PHYGENE

 

双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法,双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物,此化合物在 540nm 的吸光度与肽键的数量呈正比例关系,因此可计算出蛋白质的含量。双缩脲法测蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,但易受铜离子螯合剂的影响。另外,对于血清总蛋白的双缩脲分析,胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。双缩脲法在 5~160mg/ml浓度范围内有较好的线性关系。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。


【注意事项】
1、 蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、 待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置 1h 或60℃放置 15min,颜色会随着时间的延长不断加深。
3、 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有铜离子螯合剂。
4、 蛋白浓度低于 20mg/ml 时,颜色反应呈不明显的蓝色;当大于 40mg/ml 时,即可呈现明显的蓝紫色反应。
5、 本试剂盒的线性范围是 5~160 mg/ml,样品蛋白浓度应大于 1mg/ml,以 20mg/ml以上为宜。如需测定低浓度蛋白样品(1mg/ml),请选用 BCA 蛋白定量试剂盒。
6、 本产品反应生成的蓝紫色的化合物的吸光度,与试剂批次、pH 值、反应温度有关。因此建议,每次测定都做标准对照。
7、 氨基酸和二肽不发生双缩脲反应,三肽、寡肽和多肽与铜离子的双缩脲复合物,呈粉红色-紫红色,与蛋白质的双缩脲反应结果不同。
8、 如果没酶标仪,也可以使用分光光度计测定,使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量会显著减少。
9、 检测中发现所有孔都呈暗紫色,可能原因是样品含有还原剂,应适当透析或稀释样品。

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