产品名称 : | PH1233 | 吉姆萨/姬姆萨染色液(10×Giemsa stain) |
产品品牌 : | 飞净 PHYGENE |
产品简介:
姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa 染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Giemsa Stain 以进口的
姬姆萨色素、甲醇为主要原料,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
Giemsa Stain(10×)由 10×储存液和 10×磷酸盐缓冲液组成,按 1:1:8 混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用 Giemsa Stain 染色液染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
组分名称 |
2×100mL |
2×500mL |
试剂(A): Giemsa Stain (10×) |
100mL |
500mL |
试剂(B): 磷酸盐缓冲液(10×)
|
100mL |
500mL |
自备材料:
1、 载玻片
2、 蒸馏水
3、 甲醇
4、 显微镜
5、 0.1~0.5%乙酸
操作步骤(仅供参考):
涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制
按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8混合,即取1份Giemsa Stain(10×)、 1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水,充分混匀,即为 Giemsa工作液;Giemsa工作液为即用型试 剂,不易保存,即用即配。
2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴 染15~ 30min。
3、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
4、干燥、镜检。
织切片染色
1、Giemsa工作液的配制:按试剂( A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8配制,即取1份Giemsa Stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8 份蒸馏水,充分混匀,即 为Giemsa工作液;Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天,期间应更 换1次 固定液。
3、3%重铬酸钾固定1天。
4、流水冲洗16个小时或过夜。
5、常规脱水、包埋,切片厚度约为5μm。
6、常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水,蒸馏水清洗 2次,每次1min。
7、入含Giemsa工作液染缸,浸染18~ 24h,蒸馏水稍微清洗。
8、0.1~0.5%乙酸洗1~2min,自来水稍微冲洗。
9、用无水乙醇迅速脱水3次,每次5~10s。
10、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明,中性树脂 封固。
注意事项:
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
2、涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液 或直接对 涂片用力冲洗。
3、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
4、涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清 洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
5、染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6、组织切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物 污染切片后难以洗脱。
7、0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要 亦可用于细 胞涂片,但其浓度应适量下调;0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8、Giemsa组织切片染色中,无水乙 醇脱水要迅速,否则切片易褪色。
9、涂片染色和组织切片染色中,如需急速获得结果,可按GiemsaStain储存液(10×):磷 酸盐缓冲液=1:1配制Giemsa工作液,充 分混匀,即为 快速Gie msa染色工作液,将染色 液滴加于细胞涂片或组织切片上,加热染色,20~30s后重新加染色液,反 复5~10次,其余步骤同上。
10、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
12、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
常温运输与保存,有效期24个月有效。
温馨提示:1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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