原产于中国PH0220 | PCR产物纯化试剂盒 / PCR Purification Kit

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产品名称 : PH0220 | PCR产物纯化试剂盒 / PCR Purification Kit
产品品牌 : 飞净 PHYGENE

 

货号 PH0220
名称 PCR产物纯化试剂盒 / PCR Purification Kit
规格 100T | 200T
存储 本试剂盒在室温(15–25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2–8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10-20分钟,以平衡溶液温度。)

产品组分  
Components 100T 200T Storage
结合液PB 100 ml 200 ml 室温
3 M NaAc pH5.2 500μl 500μl 室温
漂洗液PW 25 ml 2×25 ml 室温
洗脱缓冲液EB 15 ml 15 ml 室温
吸附柱CA2 100个 2×100个 室温
收集管(2 ml) 100个 2×100个 室温
说明书 1份 1份 ——


产品简介


PCR纯化试剂盒(PCR Clean Up Kit),也称DNA纯化试剂盒(DNA Purification Kit)是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA反应体系中纯化DNA的试剂盒。


本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统,从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段,同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30-50 %)。


每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10 μg。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

产品特点

>> 结合液PB为亮黄色,便于观察体系的pH是否合适。

>>操作快捷,单个样品操作少于10分钟。


使用说明

如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1 在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液,颠倒混匀后,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g离心30-60秒,到掉收集管中的废液,将吸附柱CA2重新放入收集管中。


【注】

● 如果PCR反应体系使用了石蜡油,无需去除,但要使用10倍体积的PB液。
● 如果反应体系小于50μl,用水补至50μl体系,再加入PB液。
● 如果体系体积大于700μl,请分次上柱,保证全部溶液均加入到吸附柱中。
● 回收片段<500bp,如果要提高回收率,静置时间可延长到5min。

2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),10,000g离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。

3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10,000g离心30-60秒,倒掉废液。

4 将离心吸附柱CA2放回收集管中,10,000g离心2分钟,尽量除去漂洗液。
注意:此步必不可少!如果漂洗液有残留,将会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,室温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。

5 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。10,000g离心2分钟收集DNA溶液。

注意事项

● 可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上,这样可以提高洗脱效率。
● CA2柱的洗脱体积不应少于30 μl,体积过小将会降低回收效率。
● 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率6 DNA产物-20℃保存。

温馨提示:1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

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