PH1460 | Soil Protein Extraction Kit / 土壤蛋白提取试剂盒

货号 PH1460
名称 Soil Protein Extraction Kit / 土壤蛋白提取试剂盒
规格 50T | 100T
存储 蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白提取液室温保存。有效期：一年。

试剂组分
Component 50 assay 100 assay
Reagent A: Soil Protein Extract（土壤蛋白提取液） 50ml 100ml
Reagent B: Protease Inhibitor Cocktail（蛋白酶抑制剂混合物） 100ul 200ul

土壤蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分释放各类水溶性和脂溶性蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
蛋白酶抑制剂混合物：包含7种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA。


【注意】

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

产品简介

Phygene土壤蛋白提取试剂盒适用于从各种红壤、棕壤、褐土、黑土、栗钙土、漠土、盐碱土、岩性土和高山土等中提取土壤中总蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳，请使用Phygene相对应的试剂盒。

产品特点：

1、使用方便，将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
2、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
1)移液器、吸头
2)离心机及离心管
3)涡旋振荡器 
4)冰箱，冰盒


使用参考

使用前注意事项：

a. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
b. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
c. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
d. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。


1. 提取液制备：每 1ml 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 土壤经干燥过筛，除去植物根系等杂质，置于研钵中研磨成细小均匀颗粒。
3. 每 0.5g 研磨后的土壤[1]中加入1ml 冷的土壤蛋白提取液（提取液体积约土壤体积的3 倍左右），置于涡旋混合仪上振荡1 分钟, 使其充分混合均匀，混匀后，于摇床中在4℃条件下振荡15-20 分钟。
4. 在 4℃，14000rpm 条件下离心15 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到土壤总蛋白。
6. 将上述蛋白提取物定量[2]后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验[3]。

【注释】
[1] 土壤数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
[2] 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
[3] 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

注意事项

1. 本试剂盒仅供科学研究使用。
2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
5. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。