PH1467 | 组织胞核/胞浆分离试剂盒

产品简介

组织样本细胞核/胞浆分离试剂盒可以从各种动物实体组织如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等组织样本中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统，维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆，而几乎没有交叉污染。本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能，适合下游分析如转录活性，RNA拼接，gel－shift 分析，报告分析，酶活性分析和 WB 等。

产品组成：

规格  50T  100T

提取液 A 25ml  50ml

核保存液 B  10ml  20ml

蛋白酶抑制剂混合物  100ul  200ul

储存条件：

试剂 A 和 B 2-8℃保存；

蛋白酶抑制剂-20℃保存。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头

● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器

● 冰箱，冰盒

● 匀浆机/匀浆器

● 振荡器

● 0.01M PBS缓冲液

有效期：一年。

注意事项：

● 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用方法：

使用注意事项：

*旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

*实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

*蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

*可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1. 取 50mg-100mg 组织样本用PBS洗干净，用剪刀尽可能剪碎，加入500ul冷的试剂A，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨）。

2、将匀浆液置 2-8°C条件下振荡 20-30 分钟，

【注】

①用振荡器/摇床的较低转速，保持液体有轻微晃动即可。

②没有振荡条件的话，也可冰上静置，稍微延长处理时间，中间每隔5 分钟涡旋振荡或移液器吹打混匀。

③组织样本量根据实验情况调整，每次的提取液用量并不是一定的，大约为组织体积的 5-10倍即可，请根据实际情况调整。

④可以根据自己实验需要在每 500ul 提取液A 中加入2ul 蛋白酶抑制剂。

3、在 4°C，1200xg 条件下离心5分钟。

4、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞浆组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。

5、沉淀用 PBS 洗涤一次，在4°C，2000xg 条件下离心15分钟，弃上清。

6、沉淀为细胞核组分，将沉淀直接用于下游实验或用200ul 保存液B 重悬后保存各用。